细胞培养并没有固定的条件,可以在不同的培养基中获得良好的生长。例如,生长于MEM的细胞,可能在DMEM或M199中同样能茁壮成长。一般来说,选择MEM适合用于粘附细胞的培养,RPMI-1640则适合悬浮细胞的培养,而无血清的培养需求可使用AIMV培养基(SFM)。在新细胞培养开始前,可以参考以下推荐的培养基条件:
细胞系与推荐培养基
以下是一些细胞系及其对应推荐的培养基:
- 293:人胚胎肾成纤维细胞 - MEM,10% 热灭活马血清
- 3T6:小鼠胚胎成纤维细胞 - DMEM,10% 胎牛血清
- A549:人肺癌上皮细胞 - F-12K,10% 胎牛血清
- A9:小鼠结缔组织成纤维细胞 - DMEM,10% 胎牛血清
- AtT-20:小鼠垂体肿瘤上皮细胞 - F-10,15% 马血清及25% 胎牛血清
使用热灭活血清的原因
热灭活血清的热处理可以灭活补体系统,避免激活的补体引起细胞溶解和其他不必要的生物反应。因此,进行免疫学研究以及培养ES细胞、昆虫细胞和光滑肌细胞时,推荐使用热灭活的血清,以确保细胞培养的稳定性。
L-谷氨酰胺在细胞培养中的重要性
L-谷氨酰胺被认为是细胞培养中重要的成分,尽管其在溶液中并不稳定,会随时间降解,释放氨。氨对某些细胞具有毒性,因此在使用时需谨慎。此外,GlutaMAX-I作为其衍生物,因其稳定性较高而是一个良好的替代选择。
培养基中省去酚红的理由
酚红作为pH指示剂可帮助监控培养基的酸碱度,但其模拟固醇类激素(特别是雌激素)的特性可能干扰实验。因此,在培养哺乳类细胞时,建议使用不含酚红的培养基,以确保实验结果的准确性。
检查内毒素的方法
使用LAL(Limulus Amebocyte Lysate)试验是检测细菌内毒素的敏感方法。在不同细胞培养条件下,使用无热源水稀释样品并加热以消除抑制剂,确保准确检测内毒素水平。
储存和处理细胞的建议
在T25瓶中培养的sf9细胞进行传代时,建议使用温和的脱落细胞方法以减少对细胞的损害,并尽量避免胰酶消化,这样有利于细胞的活力和生长。同时,通过优化纸巾的储存和培养条件,可以提高细胞的健康状态。
总结
在细胞培养过程中,选择合适的培养基及生长条件至关重要。尊龙凯时致力于提供高品质的细胞培养成分与技术支持,帮助科研人员获得可靠的实验结果。